Thèse Développement de Lymphocytes t Régulateurs Ciblant des Peptides Citrullinés pour une Immunomodulation Antigène-Spécifique dans la Polyarthrite Rhumatoïde H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université de Montpellier École doctorale : Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé Laboratoire de recherche : IRMB - Cellule souches, plasticité cellulaire, régénération tissulaire et immunothérapie des maladies inflammatoires Direction de la thèse : Pascale LOUIS-PLENCE ORCID 0000000177015241 Début de la thèse : 2026-10-01 Date limite de candidature : 2026-05-11T23:59:59 La polyarthrite rhumatoïde (PR) est une maladie auto-immune chronique affectant environ 0,5 % de la population. Elle se caractérise par une inflammation persistante de la membrane synoviale conduisant progressivement à la destruction articulaire, une altération fonctionnelle majeure et une diminution de la qualité de vie des patients. Malgré des avancées thérapeutiques importantes, notamment les biothérapies ciblant les cytokines inflammatoires , une proportion significative de patients demeure réfractaire aux traitements actuels. De plus, ces stratégies reposent majoritairement sur une immunosuppression systémique, associée à des effets indésirables importants, en particulier un risque infectieux accru.
Les lymphocytes T régulateurs (Tregs) jouent un rôle central dans le maintien de la tolérance immunitaire et la prévention des réponses auto-immunes. Plusieurs études ont montré des altérations quantitatives et fonctionnelles des Tregs chez les patients atteints de PR, suggérant qu'un renforcement ciblé de leur activité pourrait constituer une stratégie thérapeutique innovante. L'ingénierie de Tregs exprimant des récepteur chimérique (CAR-Tregs) représente une approche prometteuse permettant une immunosuppression antigène-spécifique, limitant ainsi les effets systémiques. Dans la PR, les anticorps anti-protéines citrullinées (ACPA) constituent des marqueurs centraux de la maladie et participent activement à sa physiopathologie.
Nous faisons l'hypothèse que des lymphocytes CAR-Tregs ciblant spécifiquement un épitope citrulliné pourront migrer préférentiellement vers les sites inflammatoires articulaires, être activés localement par reconnaissance antigénique, exercer une suppression immunitaire localisée, et réduire l'inflammation sans induire d'immunosuppression systémique.
L'objectif du projet de thèse est de développer et valider une stratégie thérapeutique basée sur des CAR-Tregs spécifiques d'un peptide citrulliné du fibrinogène dans la PR. Les objectifs spécifiques sont (i) Construire et produire différents CAR reconnaissant un épitope citrulliné du fibrinogène, (ii) Évaluer la spécificité et la capacité d'activation des CAR in vitro, (iii) générer et caractériser des CAR-Tregs fonctionnels, (iv) Évaluer leurs propriétés suppressives et leur stabilité phénotypique et (v) Valider leur efficacité et leur spécificité dans des modèles murins humanisés.
Méthodologie : Des vecteurs lentiviraux seront générés afin d'exprimer différents CAR contenant une séquence ScFv provenant des ACPA seront développées et testés. La spécificité de ces ScFv sera évaluée après transduction de cellules Jurkat. Des Treg seront isolés par tri cellulaire puis amplifiés in vitro avant transduction. La stabilité et la fonctionnalité des CAR-Tregs seront évaluées par immunophénotypage et tests d'inhibition de la prolifération des lymphocytes T. Les CAR-Treg présentant le meilleur compromis activation/stabilité seront sélectionnés. La stratégie sera évaluée dans des modèles murins humanisés afin d'étudier la migration spécifique vers les sites inflammatoires, la persistance cellulaire, la fonctionnalité immunomodulatrice, et l'absence d'immunosuppression systémique.
Ce projet est mené en parallèle d'une stratégie complémentaire visant à cibler les lymphocytes B producteurs d'ACPA. Cette double approche pourrait permettre d'ouvrir la voie à une nouvelle classe d'immunothérapies personnalisées dans les maladies auto-immunes menant à une restauration durable de la tolérance immunitaire.
Ce projet est mené dans le cadre de l'IHU IMMUN4Cure en collaboration avec l'équipe de P. Martineau et B. Robert pour la génération de nouveaux ACPA et la production de vecteurs lentiviraux. Il repose sur des technologies maîtrisées au sein de l'institut (tri cellulaire, modèles de souris humanisés).
La polyarthrite rhumatoïde (PR) est une maladie auto-immune chronique fréquente caractérisée par une inflammation synoviale persistante conduisant à la destruction articulaire et à une altération majeure de la qualité de vie. Malgré l'efficacité des biothérapies ciblant les voies inflammatoires, un nombre important de patients reste insuffisamment contrôlé, et les traitements actuels reposent principalement sur une immunosuppression systémique associée à un risque infectieux accru. Ainsi, le développement d'approches thérapeutiques capables de restaurer une tolérance immunitaire spécifique sans compromettre l'immunité globale constitue un besoin médical majeur non satisfait.
Les Tregs sont des acteurs centraux du maintien de l'homéostasie immunitaire, et des altérations de leur fonction ont été décrites dans la PR. Toutefois, les stratégies basées sur l'expansion ou le transfert de Tregs polyclonaux restent limitées par leur manque de spécificité antigénique. L'ingénierie de Tregs exprimant des récepteurs antigéniques chimériques (CAR-Tregs) représente une avancée majeure permettant une immunomodulation de précision, reposant sur une activation locale dépendante de l'antigène.
Dans la PR, les anticorps anti-protéines citrullinées (ACPA) jouent un rôle central dans la physiopathologie et définissent des cibles antigéniques pertinentes, notamment le fibrinogène citrulliné. Cependant, le potentiel de CAR-Tregs dirigés contre ces autoantigènes pour restaurer une tolérance immunitaire locale demeure largement inexploré. Ce projet propose ainsi de développer une stratégie innovante de thérapie cellulaire visant une immunosuppression antigène-spécifique au site inflammatoire. L'objectif du projet de thèse est de développer et valider une stratégie thérapeutique basée sur des CAR-Tregs spécifiques d'un peptide citrulliné dans la Polyarthrite Rhumatoïde. Cytométrie en flux multiparamétrique
Purification cellulaire
Culture Cellulaire, test de suppression
ELISA
Construction vecteur
Transduction

Le candidat idéal pour ce projet de thèse devra posséder une formation solide en immunologie, biologie cellulaire ou biotechnologies, avec une bonne maîtrise des techniques expérimentales de culture cellulaire et d'immunophénotypage. Une expérience préalable dans la manipulation de lymphocytes T, de vecteurs viraux ou de modèles murins constituerait un atout majeur. Le doctorant doit faire preuve d'autonomie, de rigueur scientifique et de capacité à travailler dans un environnement multidisciplinaire et collaboratif. Des compétences en analyse de données, en planification expérimentale et en rédaction scientifique sont également essentielles pour assurer la qualité des publications et la diffusion des résultats. Enfin, le candidat doit démontrer un intérêt marqué pour les thérapies cellulaires innovantes et l'immunomodulation de précision, et être motivé par l'ambition de contribuer à des avancées translationales significatives dans le domaine des maladies auto-immunes.