Thèse Anticorps Bispécifiques Engageant les Lymphocytes t Comme Thérapie Cellulaire des Cancers. H/F - Doctorat.Gouv.Fr

Établissement : Université de Montpellier École doctorale : Sciences Chimiques et Biologiques pour la Santé Laboratoire de recherche : IRCM - Institut de Recherche en Cancérologie de Montpellier Direction de la thèse : Bruno ROBERT ORCID 0000000155736945 Début de la thèse : 2026-10-01 Date limite de candidature : 2026-05-11T23:59:59 Le projet de thèse vise à développer de nouveaux anticorps bispécifiques engageant les lymphocytes T gamma/delta d'un côté et ciblant par son autre bras un antigène surexprimé par la cellule tumorale à lyser. De tels anticorps ont montré de très bons résultats dans les premières études préclinique (1) et sont actuellement en cours d'essais clinique. Le point critique de cette nouvelle approche est la possible toxicité générée contre les tissus sains qui peuvent exprimer à faible niveau l'antigène cible. Nous avons développé une technologie nous permettant de générer des anticorps sensibles au pH pour éviter ces toxicités. En effet il est maintenant bien établi que les tumeurs de par leur métabolisme particulier (Warburg effect) présentent un microenvironnement acide (2). Ces anticorps pH sensible ne devraient se fixer qu'à la cible exprimée à la surface des cellules tumorales situées dans un environnement à pH acide et non sur les cellules du tissus sains dont l'environnement est à pH physiologique. Le développement du bras se fixant au TCR (sujet du travail de thèse) sera réalisé en parallèle à partir d'une banque de fragment d'anticorps scFv en utilisant la technologie du phage-display développé au laboratoire, mais aussi par sélection in-silico de fragment d'anticorps VHH ou de peptides (Collaboration Pr. Chavanieu). Les fragments d'anticorps ou peptides seront rapidement évalués pour leur capacité à activer les lymphocytes in vitro (Collaboration Dr. Lafont). Les protéines passant ce dernier test avec succès seront utilisées pour produire des anticorps bispécifiques et seront étudiés pour l'induction de la lyse spécifique d'une cellule expriment l'antigène cible en présence de lymphocytes T in vitro. Après sélection du meilleur anticorps bispécifiques des études précliniques chez l'animal seront menés pour démontrer tout le potentiel thérapeutique d'une telle stratégie.
Le projet comporte trois objectifs principaux :
1. Génération de protéines liant spécifique le TCR : Sélection de fragments scFv en utilisant la technologie de phage-display ou génération in silico de protéines spécifiques du TCR .
2. Sélection du meilleur bras anti-TCR : Études in vitro des différentes protéines à activer les lymphocytes T .
3. Production d'anticorps bispécifiques et étude in vitro et in vivo : plusieurs anticorps bispécifiques seront produits et étudiés in vitro afin de sélectionner un ou deux anticorps pour les études in vivo.
La production d'un tel anticorps bispécifique offre de nouvelles stratégies pour le traitement du cancer. Parmi les nouvelles immunothérapies à base d'anticorps, les anticorps bispécifiques engageant les lymphocytes T sont de plus en plus étudiés et utilisés en thérapie clinique notamment en hémato-oncologie avec récemment plusieurs médicaments approuvés. En revanche, ces molécules ont pour la plupart échouées pour le traitement de tumeurs solides. Récemment, un anticorps bispécifique a été approuvés pour le traitement de certains cancers du poumon car ciblant un antigène non-présent (ou très faiblement) sur les tissus sains. De notre côté, nous avons développé des anticorps pH sensibles pour éviter leur fixation sur les tissus sains (pH physiologique) et nous développons avec ces anticorps des anticorps bispécifiques engageant tous les lymphocytes T car ciblant la molécule CD3 (co-récepteur du TCR ; thèse en cours). En ciblant spécifiquement le TCR des lymphocytes gd nous espérons être plus efficaces et surtout moins toxique que les anticorps bispécifiques ciblant le co-récepteur CD3. Ce projet de thèse vise à développer un nouvel anticorps bispécifique capable de cibler les cellules tumorales et d'engager les lymphocytes T spécifiquement afin d'induire la lyse et la destruction des tumeurs. En inter-changeant le bras ciblant lantigène cible surexprimé par les cellules cancéreuses, nous pouvons espérer pourvoir traiter une grande diversité de tumeurs. Biologie cellulaire : culture cellulaire procaryote et eucaryote, tests cytotoxiques, cytométrie en flux, Excelligence, transfection transitoire.
Biochimie : western blot, gel SDS-PAGE, chromatographie d'affinité, ELISA
Biologie moléculaire : clonage d'insert, PCR, amplification et purification de plasmide d'expression.
Expériences in vivo. Modèles syngéniques ou xénogreffes.

L'étudiant devra avoir de bonnes connaissances en immunologie, biologie moléculaire avec des notions de biochimie. De plus il devra avoir une bonne connaissance théorique de la cancérologie. Des notions de base en bioinformatique seraient un plus. Le candidat devra pouvoir participer à l'expérimentation in vivo.